人脐血中血管内皮祖细胞体外扩增和鉴定的实验研究
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易成刚 郭树忠 张琳西 舒茂国 王昕梅 刘忠 艾卫兵 倪云志 第四军医大学西京医院整形外科中心 第四军医大学西京医院整形外科中心 第四军医大学西京医院整形外科中心 第四军医大学西京医院整形外科中心 第四军医大学西京医院输血科 第四军医大学西京医院整形外科中心 第四军医大学西京医院整形外科中心 第四军医大学西京医院整形外科中心
【摘要】目的:探讨从人脐血中分离、培养、体外扩增血管内皮祖细胞(EPC)的方法及体外进行EPC的鉴定。方法:采用密度梯度离心法从脐血中分离EPC,体外分别培养在包被有FN和不包被FN的培养皿中,采用免疫组织化学技术(SABC法)鉴定培养贴壁细胞表面标志CD31、CD34及KDR的表达;流式细胞仪检测细胞表面标志CD133及表达CD133细胞比例。结果:包被FN的培养皿中细胞贴壁及增殖均比未包被的多,免疫组化染色CD31、CD34及KDR均呈阳性,培养第4天流式细胞仪检测CD133+占21.3%。结论:密度梯度离心法可用于体外分离脐血中EPC进行实验研究,FN对于体外培养EPC有非常重要的作用。
【关键词】 血管内皮祖细胞 体外培养 鉴定
【基金】第四军医大学西京医院科技创新基金资助项目(XJCX03M010)
【分类号】R329.2
目前认为,血管新生的发生通过两种机制,即血管形成(angiogenesis)和血管生成(vasculogenesis)。血管形成是微血管以出芽的方式从已存在的血管床长出形成新的血管分支及毛细血管丛;而血管生成是由血管内皮祖细胞(endothelialprogenitorcell,EPC)原位分化形成血管[1]。传统的观
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[摘要]目的：探讨从人脐血中分离、培养、体外扩增血管内皮祖细胞(EPC)的方法及体外进行EPC的鉴定。方法：采用密度梯度离心法从脐血中分离EPC，体外分别培养在包被有州和不包被FN的培养皿中，采用免疫组织化学技术(SABC法)鉴定培养贴壁细咆表面柞志CD31、CD34及KDR表达；流式细胞仪检测细胞表面标志CD133及表达CDl33细胞比例。结果：包被FN的培养皿中细胞贴壁及增殖均比未包被的多，免疫组化染色CD31、CD34及KDR均呈阳性，培养第4天流式细胞仪检测CD133+占21.3%。结论：密度梯度离心法可用于体外分离脐血中EPC进行实验研究，FN对于体外培养EPC有非常重要的作用。[关键词]血管内皮祖细胞；体外培养；鉴定[中图分类号]R329.2 [文献标识码]A [文章编号]1008—6455(2004)01—0022—03
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